基因序列比对法验证实时荧光定量PCR阳性结果真伪

• 作者: Uyttendaele Mieke 唐庆娟 左涛 张祺 曹斌斌 李丹 武娟 薛长湖 赵玉然
• 来源期刊: 中国食品学报
• 关键词: 实时荧光定量PCR 假阳性 诺如病毒GⅡ.4 基因序列比对
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 食品安全与检测
• 页码范围: 212-217
• 语种: 中文
• DOI: 10.16429/j.1009-7848.2016.04.029

摘要

实时荧光定量PCR(qPCR)是检测食源性病毒的常用方法,其高度的灵敏性导致检测过程中容易产生假阳性结果.基因序列比对法是比利时根特大学食品微生物与食品保藏实验室新近建立的验证qPCR阳性结果真伪的一种方法.本研究以检测贝类诺如病毒GⅡ.4(NoV GⅡ.4)为例,采用基因序列比对法验证qPCR阳性结果的真伪.在qPCR检测时添加102copies/mL的NoV GⅡ.4质粒作为标准阳性对照,旨在排除由于qPCR的高灵敏性而产生的假阳性结果.研究结果表明,在8份NoV阳性的贝类样品中,2份为NoV GⅡ.4真阳性,2份可能为NoV GⅡ.4的变异株,1份为受到质粒污染的假阳性,其余3份为引物二聚体所致假阳性.基因序列比对法作为一种验证qPCR阳性结果真伪的高效、可行的方法,值得推广.