牛γ干扰素基因的原核表达及其单克隆抗体的研制

• 作者: 秦爱建 赵巍 邵红霞 钱琨 黄大卢
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 牛γ干扰素 原核表达 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 11-15
• 页数: 5页
• 分类号: S855.1
• 字数: 4039字
• 语种: 中文

摘要

为了制备高质量高效价抗牛γ干扰素(BoIFN-γ)的单克隆抗体,本研究将BoIFN-Y基因克隆到His标签的大肠杆菌表达载体pET32a+中,诱导表达并纯化蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠制备单克隆抗体.结果筛选到9株单抗,分别命名为BoIFN-γ-1E10、BoIFN-γ-3C2、BoIFN-γ-3E1、BoIFN-γ-6C6、BoIFN-γ-6H9、BoIFN-γ-6B6、BoIFN-γ-6E5、BoIFN-γ-2A 10和BoIFN-γ-2G10.ELISA、Western blot和间接免疫荧光试验结果显示,制备的单克隆抗体与原核、真核表达的BoIFN-γ都具有良好的反应性.本研究制备获得的针对牛γ干扰素的单克隆抗体为建立检测天然BoIFN-γ的方法提供了重要的生物材料.