针对人DNAH2蛋白的鼠源单克隆抗体的制备

• 作者: 万扬 任媛媛 孙聪聪 安文彬 常丽贤 张英驰 章婧嫽 竺晓凡 袁卫平
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 抗体,单克隆 杂交瘤 质粒 重组,遗传 DNAH2
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 细胞与分子生物学
• 页码范围: 1195-1198
• 页数: 4页
• 分类号: R341.1|R349.83
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/20160317

摘要

目的：制备特异性的鼠源单克隆抗DNAH2（Homo sapiens dynein，axonemal，heavy chain 2）抗体。方法首先针对人DNAH2蛋白N端1~300 aa序列，构建可表达His标签的免疫原融合表达质粒，在大肠杆菌内以IPTG诱导His-免疫原的表达并纯化；然后免疫BALB/c小鼠，分离出脾淋巴细胞，并与骨髓瘤细胞融合，形成杂交瘤细胞；最后以酶联免疫吸附测定（ELISA）、蛋白免疫印迹法（Western blot）筛选阳性杂交瘤细胞。结果利用IPTG有效诱导了大肠杆菌内DNAH2免疫原的表达；筛选的阳性杂交瘤细胞检测出DNAH2蛋白条带。结论成功制备针对人DNAH2蛋白的鼠源单克隆抗体。