长链非编码RNA HOTAIR影响人舌鳞癌细胞Tb3.1增殖与凋亡的体内外研究

• 作者: 周旋 孔令平 孙姗姗 张仑 王宇 王旭东 赵明慧 郭文宇
• 来源期刊: 天津医药
• 关键词: 舌肿瘤 癌,鳞状细胞 RNA,小分子干扰 细胞增殖 细胞凋亡 HOTAIR
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 细胞与分子生物学
• 页码范围: 1185-1189
• 页数: 5页
• 分类号: R739.86
• 语种: 中文
• DOI: 10.11958/20150403

摘要

目的：研究长链非编码 RNA HOTAIR 对人舌鳞癌细胞系 Tb3.1增殖与凋亡的影响。方法使用HOTAIR siRNA（siHOTAIR）敲低HOTAIR的表达；实验分为siHOTAIR组、无义序列组和空白对照组。前2组分别用siHOTAIR和无义序列转染舌鳞癌细胞，空白对照组细胞不做任何处理。实时定量PCR检测HOTAIR的表达水平；四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测Tb3.1细胞增殖；Western blot检测B细胞淋巴瘤2（Bcl-2）、活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Cleaved Caspase-3）、BAX的表达；流式细胞仪检测细胞凋亡；平板克隆形成实验检测细胞增殖情况；并行细胞衰老检测。动物实验建立Tb3.1裸鼠皮下荷瘤模型，通过免疫组织化学染色及TUNEL法评价干扰HOTAIR后对Tb3.1细胞增殖、凋亡的作用。结果 siHOTAIR处理后HOTAIR的表达水平降低；Western blot结果示Cleaved Caspase-3和BAX表达水平升高，Bcl-2表达水平降低。MTT结果显示siHOTAIR组细胞增殖受到抑制；流式细胞示siHOTAIR组细胞凋亡升高；细胞衰老实验显示siHOTAIR组细胞衰老数目增加；免疫组化结果显示， siHOTAIR组较对照组Ki-67、Bcl-2表达减少，Caspase-3、BAX表达增加；TUNEL结果显示，siHOTAIR组较空白对照组肿瘤细胞凋亡水平升高。结论干扰HOTAIR可以促进舌鳞癌细胞的凋亡并抑制其增殖，HOTAIR可以作为舌鳞癌治疗的研究方向。