金铁锁鲨烯环氧酶基因的克隆与表达

• 作者: 刘小莉 李国栋 杨耀文 钱子刚 韩丽君
• 来源期刊: 中药材
• 关键词: 金铁锁 鲨烯环氧酶 克隆 基因表达 生物信息学分析
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 资源与鉴别
• 页码范围: 2210-2216
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13863/j.issn1001-4454.2016.10.009

摘要

目的:从金铁锁Psammosilene tunicoides W.C.Wu et C.Y.Wu中克隆三萜皂苷合成途径中的关键酶鲨烯环氧酶(squalene epoxidase,SE)基因,并进行生物信息学和表达分析.方法:在转录组数据分析的基础上,利用RT-PCR方法获得金铁锁SE基因的两个克隆的全长cDNA序列及进行生物信息学分析;并进行Real-time PCR实验,测定SE在不同组织中的表达量.结果:得到2条SE cDNA,SE-1全长1 642 bp,开放阅读框1 578 bp,编码525个氨基酸;SE-2全长1 552 bp,开放阅读框1 446 bp,编码481个氨基酸;构建了pEASY-E1-SE-1及pEASY-E1-SE-2重组质粒,获得稳定的原核表达体系,SDS-PAGE结果表明所表达的蛋白与预测的蛋白大小一致.Real-time PCR结果表明SE-1、SE-2基因在根中的表达量均高于茎和叶.结论:从金铁锁中成功克隆了SE基因,可为进一步研究金铁锁中三萜皂苷合成代谢途径及其关建酶表达模式奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘小莉		32	82	5.0	7.0
2	钱子刚		63	520	14.0	19.0
3	杨耀文		46	337	11.0	16.0
4	李国栋		17	23	3.0	4.0
5	韩丽君		3	9	2.0	3.0