原生质体融合提高产谷氨酰胺转氨酶菌株产量

• 作者: 侯孝仑 刘雅清 常忠义 步国建 解秀娟 郭玮婷 金明飞 高红亮 鲁伟
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 茂原链霉菌 原生质体 再生 融合 基因组重排
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 145-150
• 页数: 6页
• 分类号: Q939.97
• 字数: 5155字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201603027

摘要

目的:研究并建立产谷氨酰胺转氨酶茂原链霉菌原生质体制备技术,通过原生质体融合技术筛选高产菌株.方法:以溶菌酶处理茂原链霉菌获得原生质体,采用原生质体融合技术,通过96孔板高通量初筛、试管复筛、摇瓶验证选育高产菌株.结果:茂原链霉菌形成的原生质体再生出的菌落直径比较小,而菌丝生成的菌落直径比较大,两种形态的菌落96孔板发酵后酶活力有显著性差异.不同的茂原链霉菌株制备原生质体,酶解程度、原生质体纯度、再生率有很大的差异,再生率最高可达1 804.25％,最低仅为12.76％.原生质融合后的高产菌株,选取96孔板初筛酶活力前3％的菌株进行试管发酵,得到高产菌株比例为32.2％,酶活力比亲本高22.4％,经摇瓶验证产酶比对照提高16.28％.结论:利用基因组重排技术,可以初步对茂原链霉菌进行高产菌株选育.