花生过敏原蛋白Ara h 6基因克隆和原核表达

• 作者: 吴志华 朱盼 詹少德 邱昌将 陈红兵
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 花生 过敏原 Ara h 6 基因克隆表达 质谱鉴定
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 125-130
• 页数: 6页
• 分类号: TS207.2
• 字数: 4802字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201603024

摘要

本实验首先从花生中提取总RNA,利用反转录聚合酶链式反应技术克隆了花生过敏原蛋白Ara h 6全cDNA,并以此为模板扩增出Ara h 6目的基因.将目的基因与pMD19-T Simple质粒进行重组后转入BL21 (DE3)宿主表达菌中,异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷诱导产物表达,并利用镍离子亲和层析纯化表达产物.DNA测序结果显示Ara h 6基因片段全长为438 bp,编码145个氨基酸,与已知该蛋白DNA序列97％相同;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示表达产物分子质量为24 kD,与融合组氨酸标签的重组Ara h 6蛋白理论分子质量相符;质谱鉴定结果表明重组蛋白的一级结构与天然Arah 6匹配度为100％;Western blotting结果显示融合蛋白能够为抗Arah 6多克隆抗体所识别,具有免疫原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈红兵	南昌大学食品科学与技术国家重点实验室中德联合研究院	117	1108	18.0	26.0
2	吴志华	南昌大学食品科学与技术国家重点实验室中德联合研究院	21	40	4.0	5.0
3	詹少德	南昌大学食品科学与技术国家重点实验室中德联合研究院	1	3	1.0	1.0
4	邱昌将		3	3	1.0	1.0
5	朱盼		1	3	1.0	1.0