RIPK3基因转染的 SH-SY5Y 细胞中 HIF-1α基因及其信号通路相关基因表达变化

• 作者: 廖吉连 张国禄 张赛 徐忠伟 涂悦 程世翔 衣泰龙
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 神经母细胞瘤 受体相互作用蛋白激酶3 低氧诱导因子1α 泛素缀合酶样蛋白 希佩尔-林道蛋白 转录延伸因子B多肽 血管内皮生长因子A
• 年，卷（期）: 2016,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 13-16
• 页数: 4页
• 分类号: R34
• 字数: 2702字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2016.07.005

摘要

目的：观察受体相互作用蛋白激酶3（RIPK3）基因转染的神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y中低氧诱导因子1α（ HIF-1α） mRNA及其信号通路相关基因表达变化。方法构建表达RIPK3基因的pCMV6-AC-GFP质粒（重组质粒），培养SH-SY5Y细胞，分为实验组及对照组，分别转染重组质粒和空载质粒。采用Western blotting法检测细胞中的RIPK3蛋白，分别于培养8、14、20、26、32、38 h后，通过MTT实验检测细胞增殖情况（ OD值）。采用转录组测序技术（ RNAseq）及Ingenuity Pathway Analysis（ IPA）软件检测并筛选RIPK3-HIF1α下游信号通路中的关键基因。采用微滴式数字PCR（ ddPCR）检测两组细胞中的HIF-1αmRNA。结果实验组细胞中RIPK3蛋白相对表达量（0．806±0．0975）高于对照组（0．455±0．0886），P＜0．05。随培养时间延长，实验组细胞增殖受到抑制。实验组细胞中HIF-1αmRNA相对表达量（0．01543±0．00347）低于对照组（0．04628±0．01026），P＜0．05。在HIF-1α为核心的相互作用关系网络中，筛选出关键分子泛素缀合酶样蛋白（ UBC）、希佩尔－林道蛋白（ VHL）、转录延伸因子B多肽1（ TCEB1）、血管内皮生长因子A（ VEGFA）。结论 RIPK3基因转染SH-SY5Y后，细胞中HIF-1αmRNA表达下调，同时HIF-1α信号通路相关基因（ UBC、VHL、TCEB1、VEGFA）的表达水平受到影响。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张赛		95	567	12.0	19.0
2	涂悦		55	284	10.0	15.0
3	徐忠伟	武警后勤学院中心实验室	18	29	3.0	5.0
4	衣泰龙		6	9	2.0	2.0
5	程世翔		16	68	5.0	8.0
6	张国禄		1	1	1.0	1.0
7	廖吉连		1	1	1.0	1.0