猪丹毒杆菌噬菌体裂解酶的原核表达及活性检测

• 作者: 夏雨婷 张亚宁 李玉峰 苑文涛
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪丹毒杆菌 噬菌体 裂解酶 表达 活性
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 37-40
• 页数: 4页
• 分类号: S852.6
• 字数: 3405字
• 语种: 中文

摘要

根据猪丹毒杆菌噬菌体基因测序结果,设计针对裂解酶(Ely)的特异性扩增引物,PCR扩增获得Ely产物,PCR产物经酶切后克隆人表达载体pET-28a(+),获得重组质粒pET-28a(+)-Ely,并转化至大肠杆菌BL21 (Rosetta)中.以1mmol/L IPTG在28℃诱导8h,SDS-PAGE结果表明,蛋白在上清中高效表达;通过Ni2+-NTA亲和层析法纯化目的蛋白,其纯度在90％以上;以100、10和1μg/mL的终浓度作用于猪丹毒杆菌培养物,每隔1h进行一次菌落计数,直至7h,结果表明该裂解酶在体外可以有效裂解猪丹毒杆菌,并呈一定的时间和剂量依赖性.该研究将为治疗耐药性猪丹毒杆菌感染提供新的思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玉峰	南京农业大学农业部细菌学重点开放实验室	105	845	16.0	23.0
2	张亚宁	南京农业大学农业部细菌学重点开放实验室	5	19	2.0	4.0
3	苑文涛	南京农业大学农业部细菌学重点开放实验室	3	12	2.0	3.0
4	夏雨婷	南京农业大学农业部细菌学重点开放实验室	3	9	2.0	3.0