β-连环素通路对转化生长因子β1致肺纤维化的调控作用

• 作者: 常琴 殷得莉 王慧芳 田新利 田新瑞 郑国平 霍如婕
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: 肺纤维化 β连环素 转化生长因子β1 上皮细胞-间质转化 巨噬细胞
• 年，卷（期）: 2016,（24）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1929-1933
• 页数: 5页
• 字数: 3761字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2016.24.013

摘要

目的 探讨β-连环素通路对转化生长因子β1(TGF-β1)致肺纤维化的调控作用.方法 体外培养的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(RLE-6TN细胞)分为四组:A1.对照组;B1.加5μg/L TGF-β1的TGF-β1组;C1.转染真核表达载体pcDNAβ.0(pcDNA)后加5μg/L TGF-β1的pcDNA+ TGF-β1组;D1.转染β-连环素敲除载体[F-(β-TrCP)-Ecad]后加5μg/L TGF-β1的F-(β-TrCP)-Ecad+ TGF-β1组.24 h后,显微镜下观察各组细胞形态,Western印迹法检测各组细胞上皮钙黏素、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和纤维连接蛋白(Fn)表达;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组细胞培养上清液中促纤维化转录产物Snail mRNA的表达.体外培养的大鼠肺泡巨噬细胞(CRL-2192细胞)分为五组:A2.对照组;B2.加20μg/L干扰素γ的干扰素γ组;C2.加10 μg/L TGF-β1和20 μg/L干扰素γ的TGF-β1+干扰素γ组;D2.转染F-(β-TrCP)-Ecad后加入C2组相同试剂的F-(β-TrCP)-Ecad+TGF-β1+干扰素γ组;E2.转染野生型β-连环素表达载体(WTβ-连环素)后加入C2组相同试剂的WTβ-连环素+TGF-β1+干扰素γ组.24h后,Western印迹法检测A2、B2、C2组中β-连环素蛋白的表达;RT-PCR检测各组细胞培养上清液诱导型一氧化氮合酶(iNOS) mRNA的表达.结果 B1、C1组RLE-6TN细胞形态变为梭形,D1组细胞形态基本呈铺路石样;B1、C1组RLE-6TN细胞纤维细胞特征蛋白α-SMA、Fn蛋白及下游促纤维化转录产物Snail mRNA表达均显著高于A1组,而上皮细胞特征蛋白上皮钙黏素蛋白表达显著低于A1组;D1组细胞α-SMA、Fn蛋白、Snail mRNA表达均显著低于C1组(0.352±0.076比0.937±0.303、0.319±0.072比0.903±0.211、3.675±0.642比9.708±2.031),而上皮钙黏素蛋白表达显著高于C1组(1.482±0.227比0.604±0.121)(均P＜0.05).CRL-2192细胞中,β-连环素蛋白表达水平低且A2、B2、C2组β-连环素蛋白表达差异无统计学意义;B2组iNOS mRNA表达显著高于A2、C2、D2、E2组(64.95±4.47比9.87±0.73、21.32±2.41、18.35±3.61、22.87±3.14)(均P＜0.01),C2、D2、E2组iNOS表达均高于A2组(均P＜0.05),而C2、D2、E2三组间比较差异无统计学意义.结论 阻断β-连环素通路可抑制TGF-β1诱导的上皮细胞间质转化而不影响其抗炎作用,从而实现β-连环素通路对TGF-β1致肺纤维化作用的调控.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田新瑞	山西医科大学第二医院呼吸与危重症医学科	22	63	4.0	6.0
2	田新利	北京军区总医院心肺中心	39	235	9.0	12.0
3	常琴	山西医科大学第二医院呼吸与危重症医学科	5	28	4.0	5.0
4	郑国平	山西医科大学生物化学与分子生物学系	5	25	3.0	5.0
5	霍如婕	山西医科大学第二医院呼吸与危重症医学科	6	14	3.0	3.0
6	王慧芳	山西大同市第五人民医院呼吸内科	3	3	1.0	1.0
7	殷得莉	山西医科大学第二医院呼吸与危重症医学科	1	3	1.0	1.0