坏死性凋亡介导高糖引起的人脐静脉内皮细胞损伤

• 作者: 吴文 张伟杰 智喜梅 林佳琼 许翎 邓海鸥 郭瑞鲜 陈美姬 黎映兰
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 坏死性凋亡 细胞凋亡 高糖 人脐静脉内皮细胞 Necrostatin-1
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1608-1613
• 页数: 6页
• 分类号: R329.21
• 字数: 4366字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2016.09.013

摘要

目的：研究坏死性凋亡是否介导高糖（HG）诱导的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endo－thelial cells，HUVECs）损伤。方法： CCK－8法检测细胞存活率；Western blot 法测定受体相互作用蛋白3（RIP3）、cleaved caspase－3的蛋白水平；罗丹明123染色荧光显微镜照相法检测线粒体膜电位（mitochondrial membrane poten－tial，MMP）；双氯荧光素（DCFH－DA）染色荧光显微镜照相法测定胞内活性氧簇（reactive oxygen species，ROS）的水平。结果：应用不同浓度葡萄糖（10、20和40 mmol／L）处理 HUVECs 24 h，RIP3的蛋白水平随葡萄糖剂量增加而升高，40 mmol／L 时达高峰；应用40 mmol／L 葡萄糖处理 HUVECs 3 h、6 h、9 h、12 h 和24 h 能上调 RIP3的蛋白水平，于9 h 达最高峰；应用20μmol／L 凋亡蛋白酶抑制剂 Z－VAD－FMK 预处理 HUVECs 30 min 促进 RIP3表达；应用100μmol／L 坏死性凋亡抑制剂 necrostatin－1预处理 HUVECs 1 h 能抑制 HG 诱导 HUVECs 的细胞存活率降低，ROS过度生成及 MMP 丢失，但能升高 cleaved caspase－3的蛋白水平。结论：坏死性凋亡介导高糖引起的人脐静脉内皮细胞损伤，但与内皮细胞凋亡存在负相关。