前梯度蛋白2干扰质粒的构建及其对鼻咽癌细胞生物学功能的影响

• 作者: 卢金平 唐发清 李跃进 王巍巍
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 鼻咽癌 前梯度蛋白2 肿瘤转移
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1545-1550
• 页数: 6页
• 分类号: R730.23
• 字数: 4133字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2016.09.002

摘要

目的：构建前梯度蛋白2（AGR2）基因干扰重组质粒及建立 AGR2基因沉默的鼻咽癌细胞及动物模型，检测 AGR2对鼻咽癌细胞的生物学功能的影响。方法：首先以 real－time PCR 和 Western blot 验证 AGR2在鼻咽癌细胞系5－8F 和6－10B 中的表达，以高表达 AGR2的5－8F 细胞作为干扰转染的目标细胞；设计及构建 shRNA 表达载体 pSR－GFP／Neo－AGR2－shRNA，将其转染至5－8F 鼻咽癌细胞系中，通过 Transwell 小室迁移及侵袭实验来检测其迁移和侵袭功能的变化。结果：与6－10B 细胞比较，AGR2在5－8F 中的表达显著上调（P ＜0．05）；干扰鼻咽癌细胞5－8F 中的 AGR2可使细胞迁移和侵袭功能明显减弱（P ＜0．05），使其体外成瘤能力显著降低（P ＜0．05）。结论：AGR2在鼻咽癌细胞系5－8F 中明显高表达；pSR－GFP／Neo－AGR2－shRNA 可成功干扰5－8F 中 AGR2的表达；AGR2可抑制5－8F 细胞的迁移、侵袭及体内成瘤能力。