转基因水稻标准质粒分子的构建与分析

• 作者: 侯红利 刘晋 周向阳 李永红 杨启鹏 王学林 邓汉超 陈惠芳
• 来源期刊: 中国种业
• 关键词: 标准质粒分子 实时荧光PCR 标准曲线 PCR效率
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 52-55
• 页数: 4页
• 语种: 中文

摘要

针对目前转基因(GM)产品检测标准分子的缺乏,构建适用于转基因水稻的标准质粒分子pMDSPS和pMDTheli,其中包含水稻内源基因SPS通用序列,耐盐基因ThST3和Ubiquitin启动子序列的构建特异性Theli序列.对其特异性及制备标准曲线的可靠性进行鉴定研究,研究结果显示,在进行普通PCR扩增时,采用质粒标准分子为阳性对照,均能特异扩增目的条带.以标准质粒分子构建的标准曲线,SPS基因的定量标准曲线的相关系数平均为0.9993,PCR扩增效率在1.0004～1.034之间;ThST3基因的定量标准曲线的相关系数平均为0.9937,PCR扩增效率在0.9358～0.9486之间.因此,构建的标准分子pMDSPS和pMDTheli既能作为普通PCR的阳性对照,也能用于定量标准曲线的构建,为转基因水稻的定量检测提供简便、价格低廉的标准分子打下基础.