结核分枝杆菌体外休眠模型的建立

• 作者: 付晓蕊 周磊 旦正尖措 苏明权 郑青 郝晓柯 马越云
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 休眠 金胺O 尼罗红 hspX基因 devR基因
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2032-2036
• 分类号: R521|R378.91
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2016.11.008

摘要

目的:模拟结核分枝杆菌体内缺氧和微营养的生长环境建立其休眠模型.方法:将牛分枝杆菌卡介苗野生株BCG菌株在“微需氧+pH5.0+10％ Dubos”的条件下培养,以菌株生长停滞,菌体表面脂质体增厚为休眠标准进行鉴定.取不同时间菌株测定600 nm下的吸光度(A)值绘制生长曲线,同时进行金胺O-尼罗红(Auramm-O,Nile Red)双荧光染色和实时荧光定量PCR(Quantitative Realtime-PCR,qRT-PCR)检测休眠相关基因的表达量,确定菌株进入休眠状态.结果:在休眠条件培养过程中,BCG菌株的生长速度与常规条件培养菌株相比明显减慢(P＜0.01),并且在休眠条件培养中第10、14和18天细菌生长基本接近停滞状态(P＜0.01);同时金胺O荧光染色显示绿色荧光减弱,尼罗红红色荧光增强;休眠相关基因hspX、devR表达量逐渐上调,且培养第18天菌株明显高于第0天培养菌株(P＜0.05).结论:应用“微需氧+pH5.0+10％Dubos”条件培养,以金胺O-尼罗红染色和devR表达为标准,可以成功建立结核分枝杆菌休眠模型.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郝晓柯	第四军医大学西京医院检验科	322	1751	18.0	23.0
2	马越云	第四军医大学西京医院检验科	112	451	11.0	15.0
3	苏明权	第四军医大学西京医院检验科	226	1052	14.0	20.0
4	周磊	第四军医大学西京医院检验科	9	14	2.0	3.0
5	付晓蕊	第四军医大学西京医院检验科	2	1	1.0	1.0
6	郑青	第四军医大学西京医院检验科	3	2	1.0	1.0
7	旦正尖措	第四军医大学西京医院检验科	2	1	1.0	1.0