调控人骨髓间充质干细胞成骨分化的miR-106a及其靶基因骨形态发生受体蛋白2

• 作者: 顾夙
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 骨髓干细胞 骨形态发生受体蛋白2 miR-106a 骨髓间充质干细胞 成骨分化 分子机制 荧光素酶报告 转染 碱性磷酸酶
• 年，卷（期）: 2016,（28）
• 所属期刊栏目: 研究与报告 -- 骨髓干细胞
• 页码范围: 4109-4116
• 页数: 8页
• 分类号: R394.2
• 字数: 6837字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.28.001

摘要

背景：正常生理条件下，人骨髓间充质干细胞的骨生成和脂肪生成维持平衡，成骨分化是骨骼发展的重要过程，骨骼形成需要成骨细胞的分化和成熟。目的：探索miR-106及其靶基因骨形态发生受体蛋白2在成骨分化中的作用，为后续研究奠定基础。方法：使用成骨诱导培养基诱导骨髓间充质干细胞分化为成骨细胞，通过Western blot和碱性磷酸酶染色检测成骨分化标志物表达情况判断成骨分化进程。通过转染模拟剂过表达miR-106a，转染siRNA敲降骨形态发生受体蛋白2的表达，分别使用Real-time PCR和Western blot检测miR-106a和骨形态发生受体蛋白2表达情况。TargetScan软件预测和双荧光素酶报告实验验证miR-106a和骨形态发生受体蛋白2的相互作用。结果与结论：在成骨分化过程中miR-106a表达下调，骨形态发生受体蛋白2表达上调。过表达miR-106a，结果发现碱性磷酸酶活性下降，成骨分化标志蛋白Runx2和OCN表达量下降，同时骨形态发生受体蛋白2表达下调。使用TargetScan预测骨形态发生受体蛋白2可能是miR-106a的靶基因，双荧光素酶报告实验验证了预测结果。敲降骨形态发生受体蛋白2的表达，成骨分化受到抑制。结果表明miR-106a通过靶向骨形态发生受体蛋白2从而调控骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化。