农杆菌介导McCHIT1基因遗传转化水稻茎尖研究

• 作者: 仇志浪 张笑寒 赵德刚
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 水稻 茎尖 遗传转化 McCHIT1基因
• 年，卷（期）: 2016,（27）
• 所属期刊栏目: 生物科学
• 页码范围: 114-120
• 分类号: Q785
• 语种: 中文

摘要

为了提高农杆菌介导的水稻茎尖遗传转化效率,笔者以贵州特有的地方水稻品种‘平塘黑糯’茎尖为材料,以含有Ubiqutin启动子驱动苦瓜几丁质酶基因McCHIT1表达的植物表达载体pCambia-UbiMcCHIT1为转化载体,采用正交试验设计,系统研究了菌液OD600值、真空处理时间和真空渗透压强对水稻茎尖遗传转化效率的影响.结果表明:在3个因素中,真空处理时间是影响水稻转化效率和死亡率的最关键因素.农杆菌介导‘平塘黑糯’茎尖遗传转化的最优条件为农杆菌菌液浓度OD600为1.0、真空处理时间为7 min、真空渗透压强为15 kPa.GUS组织化学染色和PCR分子鉴定表明,通过本研究优化的农杆菌介导水稻茎尖遗传转化体系,已将苦瓜的几丁质酶基因McCHIT1已整合到水稻基因组中,获得转McCHIT1基因‘平塘黑糯’新种质.