基于口蹄疫病毒非结构蛋白3AB/2C的ELISA鉴别检测试剂盒的研制与应用

• 作者: 何洪彬 李金林 沈志强 王洪梅 王艳萍 王金良 董林
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 口蹄疫 3AB/2C 鉴别检测 ELISA试剂盒
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 兽医科技
• 页码范围: 71-76
• 页数: 6页
• 分类号: S851.3
• 字数: 4871字
• 语种: 中文

摘要

基于口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白3AB/2C,研制快速鉴别口蹄疫自然感染和疫苗接种的ELISA检测试剂盒.诱导表达3AB/2C蛋白,His亲和层析纯化目的蛋白;以纯化的3AB/2C蛋白为包被抗原,建立间接ELISA方法,优化ELISA反应条件;标准化ELISA操作规程和试剂盒组分,组装ELISA试剂盒,进行特异性、敏感性、符合率、重复性、血清交叉反应、保存期等性能评价;分离临床牛血清进行应用性检测,评价ELISA试剂盒适用性.结果获得了大小约51 ku可溶性表达3AB/2C蛋白,亲和层析纯化后纯度可达90％以上;确定最适抗原包被浓度为3.25μg/mL,血清稀释度1:80,封闭液为2％乳清蛋白,封闭条件为37℃1h4℃10h;试剂盒敏感性97.5％、特异性98.3％,批内、批间变异系数分别为3.40％ ～6.71％和5.20％ ～ 8.44％;与3种商品化试剂盒符合率分别为98.90％、98.02％和96.72％;试剂盒4℃条件下保存期可达12个月;1457份临床样品检测,FMDV感染阳性率6.41％ ～30.35％.本研究研制的鉴别ELISA试剂盒检测结果可靠、稳定性好,能有效鉴别FMDV自然感染和疫苗免疫,可为FMD综合防控提供技术支撑.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王洪梅	山东省农业科学院奶牛研究中心	101	626	12.0	18.0
2	何洪彬	山东省农业科学院奶牛研究中心	59	320	10.0	13.0
3	沈志强		2	3	1.0	1.0
4	董林		1	3	1.0	1.0
5	王金良		1	3	1.0	1.0
6	王艳萍		1	3	1.0	1.0
7	李金林		1	3	1.0	1.0