酶法产L-丙氨酰-L-谷氨酰胺重组大肠杆菌pepD/pepN基因的敲除及其发酵优化

• 作者: 刘沛沛 周豪 孙付保 张震宇
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: L-丙氨酰-L-谷氨酰胺 大肠杆菌 生物酶法 基因敲除 λRed同源重组 发酵优化
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 7-14
• 页数: 8页
• 字数: 5371字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201606002

摘要

L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(L-alanyl-L-glutamine,L-Ala-L-Gln),是目前国内外公认的L-谷氨酰胺载体,在临床医学和营养学等领域有广泛应用.为了减少丙谷二肽在生物酶法生产过程中菌体对其降解,利用λRed同源重组系统,敲除大肠杆菌中肽酶D和氨肽酶对应的编码基因.与野生型菌株相比,双敲除突变菌株的全细胞酶活提高了0.29倍.对该菌株进行摇瓶发酵优化,得到最优培养基为(g/L):葡萄糖12、酵母提取物10、胰蛋白胨10、(NH4)2SO4 1、KH2 PO4 3、K2 HPO4 1、MgSO4 0.2;最优发酵温度为27℃;最佳反应条件为:Gln 200 mmol/L、Ala-Ome·HCl 200 mmol/L,反应pH8.5,反应温度25℃.在最优条件下发酵36 h,丙谷二肽产量达到了14.51g/L反应液,是优化前的4.74倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘沛沛	江南大学工业生物技术教育部重点实验室糖化学与生物技术教育部重点实验室	1	2	1.0	1.0
2	张震宇	江南大学工业生物技术教育部重点实验室糖化学与生物技术教育部重点实验室	18	41	3.0	6.0
3	孙付保	江南大学工业生物技术教育部重点实验室糖化学与生物技术教育部重点实验室	20	41	4.0	5.0
4	周豪	江南大学工业生物技术教育部重点实验室糖化学与生物技术教育部重点实验室	4	7	2.0	2.0