氨基树脂表面活化提高固定化核酸酶P1连续催化性能

• 作者: 何林姣 刘晓静 庄伟 应汉杰 黄金莎
• 来源期刊: 化工学报
• 关键词: 氨基树脂 核酸酶P1 交联 表面活化 柱连续反应器
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 生物化学工程与技术
• 页码范围: 3850-3860
• 页数: 11页
• 分类号: Q814
• 语种: 中文
• DOI: 10.11949/j.issn.0438-1157.20160280

摘要

考察了固定化酶常用载体-氨基树脂几何结构及表面活化过程对固定化核酸酶 P1性能的影响，并进行了动力学和连续催化稳定性研究。FESEM、BET及FTIR等表征发现，氨基树脂具有大量酶可利用的孔，在固定化过程中核酸酶P1主要利用的孔径范围为4～30 nm。相对游离的核酸酶P1而言，所得固定酶耐酸、耐热性增强；米氏动力学研究表明各组固定酶对底物的亲和力下降，最大反应速率下降；后交联组的重复利用性相对物理吸附、化学交联组明显增强。优化的固定化条件为：酶和载体比例为3：20（质量比），酶浓度为0.8 g·L?1，酶液pH为6.0，固定时间为10 h，在优化条件下所得固定酶的单位载体酶活为10013 U·g?1。同时设计及优化柱连续反应器操作条件，确定反应温度为65℃，进料流量为0.75 ml·min?1，使得产品的核苷酸浓度维持30 g·L?1（水解率为60%）以上的累计时长达120 h，有利于核酸酶P1连续生产核苷酸的工业化应用。