为加速分子标记在黑麦草中的应用,利用黑麦草 EST 数据库(GenBank /dbEST)开展了黑麦草EST -SSR 信息分析、标记开发和 EST 功能分析研究。在25752条黑麦草 EST 序列中,共发现346条 SSR 序列,占整个 EST 总数的1.344%。其中,三核苷酸基序最多(39.60%),次之为二核苷酸基序(31.79%)。三核苷酸基序以 GGC /CCG 出现频率最高,为8.38%,其次是 CGC /GCG(7.51%)、GCC /CGG(4.05%)和 ATG/TAC(2.02%),二核苷酸基序以 CT/GA 出现频率最高(14.45%),其次是 GA /CT(10.98%)。根据这些含有SSR 的 EST 序列,利用 Primer Premier 5.0软件,对346条 EST -SSR 序列进行引物设计,共设计引物193对,其中分值在90分以上的有113对(32.66%)。利用 GenBank 的 BlastN 和 BlastX 程序对相应113条 EST 进行功能分析,72条 EST 序列与51种具有生物学功能的蛋白质同源。