人脐带间充质干细胞体外规模化、标准化制备技术研究

• 作者: 何洁 庞荣清 潘兴华 王金祥 蔡学敏 赵晶
• 来源期刊: 西南国防医药
• 学科: 医学
• 关键词: 脐带 间充质干细胞 制备 鉴定,规模化 标准化
• 年，卷（期）: 2016,（12）
• 所属期刊栏目: 干细胞与再生医学
• 页码范围: 1395-1397
• 页数: 3页
• 分类号: R318.1
• 字数: 2622字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-0188.2016.12.012

摘要

目的 建立人脐带间充质干细胞标准化、规模化制备技术.方法 在无菌条件下,采集剖腹产婴儿脐带30条,长40～50 cm,弃被膜、血管后,剪成1 mm3的组织块,置于含10％胎牛血清的DMEM/F12的培养瓶中进行组织块反复贴壁培养,采用倒置相差显微镜动态观察细胞的生长及形态,对传代培养的第3代细胞采用流式细胞分析法进行细胞周期及表形分析,采用体外定向诱导分化实验观察多向分化潜能.结果 组织块贴壁后于第4d开始向周围呈放射状长出细胞,平均12 d左右长满瓶底,细胞形态呈均一梭形;传代培养后生长快速,于4～5 d达80％融合;连续传代3次,其生长特性和形态不变,CD90、CD29阳性率＞99％,CD105阳性率＞81％,不表达CD34,CD45,在体外能分化成骨、软骨、脂肪细胞.平均每条脐带获得细胞数＞6×109个.结论 通过多条人脐带重复分离培养,建立了体外规模化、标准化的人脐带间充质干细胞的制备与鉴定技术规范及标准,可为人脐带间充质干细胞库建设和临床应用提供技术支持和标准化脐带间充质干细胞.