沉默DNA依赖蛋白激酶亚基对肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu DNA损伤修复功能的影响

• 作者: 余春波 李大玉 李长福 束波 杨加伟 梁大敏 生欣 范芳
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: DNA依赖性蛋白激酶亚基 肝癌耐药细胞/Bel-7402/5-Fu细胞 DNA损伤修复
• 年，卷（期）: 2016,（17）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 19-22
• 页数: 4页
• 分类号: R735.7
• 字数: 2891字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2016.17.004

摘要

目的 探讨DNA依赖蛋白激酶亚基(DNA-PKcs)基因沉默后对肝癌耐药细胞Bel-7402/5-FuDNA损伤修复功能的影响.方法 采用阳离子脂质体法将shDNA-PKcs干扰质粒转染Bel-7402/5-Fu细胞,根据荧光细胞数计算转染率,实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及Western blot检测DNA-PKcs的沉默效率;Western blot检测TopoⅡ、γ-H2AX蛋白表达;5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷法检测细胞DNA合成.结果 质粒的转染效率为67％;qRT-PCR及Western blot检测结果显示,DNA-PKcs mRNA及蛋白水平的沉默效率分别为82.6％和71.8％;Western blot结果显示,实验组TopoⅡ蛋白表达水平比对照组低,差异有统计学意义(P＜0.05),γ-H2AX蛋白表达水平比对照组高,差异有统计学意义(P＜0.01).5-乙炔基-2'脱氧尿嘧啶核苷法结果显示,实验组DNA合成率比对照组低,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 shDNA-PKcs干扰质粒能下调Bel-7402/5-Fu细胞中DNA-PKcs、TopoⅡ蛋白的表达,抑制Bel-7402/5-Fu细胞DNA合成.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	束波	遵义医学院生化教研室	25	74	4.0	6.0
2	范芳	遵义医学院生化教研室	50	126	6.0	7.0
3	李长福	遵义医学院生化教研室	42	102	6.0	7.0
4	杨加伟	遵义医学院生化教研室	20	37	4.0	5.0
5	李大玉	遵义医学院生化教研室	17	34	3.0	4.0
6	梁大敏	遵义医学院生化教研室	3	13	2.0	3.0
7	生欣	遵义医学院生化教研室	15	25	3.0	4.0
8	余春波	遵义医学院生化教研室	8	10	2.0	3.0