转染沉默IGF1R基因的肝癌细胞株增殖、迁移及侵袭能力观察

• 作者: 别彩群 汤绍辉 石珩 颜英 黄秋燕
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 人胰岛素样生长因子1受体基因 小干扰RNA 肝细胞癌
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4
• 页数: 4页
• 分类号: R735.7
• 字数: 3260字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2016.11.001

摘要

目的 设计并筛选高效沉默胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)基因的小干扰RNA(siRNA),构建其慢病毒表达载体,观察转染沉默IGF1R基因的肝癌细胞株增殖、迁移及侵袭能力.方法 根据siRNA设计原则,参照IGF1R mRNA序列设计3对siRNA序列及1对阴性对照序列,转染肝癌细胞株Huh724 h后采用实时荧光定量PCR检测IGF1R mRNA,筛选干扰效率最高的siRNA序列.构建该序列的慢病毒表达载体,转染293T细胞进行病毒包装.将包装好的慢病毒表达载体感染肝癌细胞株Huh7和Hep3B,筛选沉默IGF1R基因表达的稳定细胞株.将上述稳定细胞株扩大培养,观察细胞IGF1R mRNA表达变化及细胞增殖、迁移与侵袭能力变化.结果 实时荧光定量PCR显示,IGF1R_002序列在100 nmol/L浓度时抑制效率最高,达78.6%.与未感染任何病毒的Huh7、Hep3B细胞,感染pLVX-shRNA2空载体的Huh7、Hep38细胞相比,感染携带IGF1R干扰序列慢病毒的Huh7、Hep3B细胞IGF1R mRNA表达水平显著下调,细胞增殖活性明显降低,细胞迁移和侵袭能力明显受到抑制(P均＜0.01).结论 筛选出1对高效沉默IGF1R基因的siRNA序列,即IGF1R_002;该siRNA介导的IGF1R基因沉默可明显抑制肝癌细胞株Huh7和Hep3 B增殖、迁移与侵袭.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汤绍辉		164	444	9.0	14.0
2	黄秋燕		8	32	4.0	5.0
3	石珩		4	14	2.0	3.0
4	颜英		6	15	3.0	3.0
5	别彩群		5	22	3.0	4.0