过表达Brahma-相关基因1腺病毒载体对氧化应激诱导心肌细胞凋亡的影响

• 作者: 侯宁 李素娟 袁文常 麦云珮
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 实验动物 心血管及肺损伤与修复动物模型 Brahma-相关基因1 腺病毒载体 糖尿病心肌病 氧化应激 心肌细胞 转染 基因治疗 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2016,（40）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 细胞损伤与修复模型
• 页码范围: 6021-6027
• 页数: 7页
• 分类号: R318
• 字数: 5510字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.40.014

摘要

背景：Brahma-相关基因1是调节染色质重构的重要核蛋白，在糖尿病心肌病中表达降低。<br>　　目的：构建大鼠Brahma-相关基因1重组腺病毒载体，评价其在氧化应激诱导原代心肌细胞凋亡中的保护作用。<br>　　方法：构建Brahma-相关基因1重组腺病毒载体质粒，经人胚肾293T细胞包装、扩增、计算滴度后，将Brahma-相关基因1重组腺病毒转染入SD乳鼠原代培养心肌细胞，以空载体EGFP转染细胞及正常细胞作为对照，24 h后，荧光显微镜观察转染效率；荧光定量PCR、免疫印迹法检测细胞Brahma-相关基因1mRNA、蛋白表达；24 h后，分别加入100μmol/L H2O2处理12 h，免疫印迹法检测Brahma-相关基因1蛋白表达、凋亡标志物cleaved-Caspase3表达，流式细胞仪检测细胞凋亡率。<br>　　结果与结论：①构建的重组腺病毒成功转染至心肌细胞，转染效率达90%以上，被转染细胞的Brahma-相关基因1 mRNA、蛋白表达明显增高；②H2O2可显著抑制心肌细胞Brahma-相关基因1表达，诱导心肌细胞凋亡，刺激心肌细胞cleaved-Caspase3表达；Brahma-相关基因1重组腺病毒可减轻由H2O2导致的上述心肌细胞损伤；③结果表明，氧化应激能直接抑制心肌细胞Brahma-相关基因1表达， Brahma-相关基因1在氧化应激诱导的心肌细胞凋亡中发挥保护作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁文常	解放军兰州军区乌鲁木齐总医院检验科	4	5	1.0	1.0
2	李素娟	广州医科大学药学院药理学教研室	2	7	1.0	2.0
6	麦云珮	广州医科大学药学院药理学教研室	2	6	1.0	2.0
10	侯宁	广州医科大学药学院药理学教研室	4	5	1.0	1.0