SIRT6对肝细胞脂质合成的影响及其转录基因分析

• 作者: 丁美玲 刘巧云 张松 曹海超 聂勇战 马澜婧
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: TALEN L-02 SIRT6-KO 脂质代谢 差异转录基因
• 年，卷（期）: 2016,（15）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2831-2835
• 分类号: R-33|Q789|R575
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2016.15.008

摘要

目的:在肝脏L-02 SIRT6-KO细胞系中,观察SIRT6在肝脏脂滴形成中的作用,初步研究在肝脏脂质代谢中SIRT6相关的转录差异基因发挥作用的分子机制.方法:利用基因敲除技术TALEN技术,构建肝脏L-02 SIRT6特异性敲除细胞系,并经qPCR和Western blot检测其表达水平;利用油酸刺激L-02 SIRT6-KO细胞及其对照组,体外模拟肝脏脂肪变的条件,并经高内涵和油红染色验证其脂滴形成能力;利用基因芯片检测L-02 SIRT6-KO及其对照细胞系中相关差异基因,并经生物信息学分析筛选脂代谢相关差异基因.结果:建立人肝脏SIRT6特异性敲除细胞系,qPCR显示mRNA下降50％,但Western blot证明SIRT6完全敲除;BODIPY实验及油红O染色发现,L-02 SIRT6-KO细胞比对照组其脂滴形成数量增多,高内涵荧光检测显示L-02 SIRT6-KO细胞中脂滴荧光强度比对照组增强(176.38±2.55 vs 104.26+ 2.08);通过对差异转录基因分析,发现了一组在脂质代谢中和SIRT6相关的关键基因如STEAP4、HMGA2、PDE1A、INSL4等.结论:成功建立人肝脏L-02 SIRT6-KO细胞系,并经实验证明SIRT6缺失能够促进脂滴形成;筛选到一组和SIRT6相关参与脂质代谢的关键基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	聂勇战	第四军医大学西京消化病医院肿瘤生物学国家重点实验室	35	194	8.0	12.0
2	曹海超	第四军医大学西京消化病医院肿瘤生物学国家重点实验室	3	4	1.0	2.0
3	张松	第四军医大学西京消化病医院肿瘤生物学国家重点实验室	16	34	3.0	3.0
4	丁美玲	第四军医大学西京消化病医院肿瘤生物学国家重点实验室	4	6	2.0	2.0
5	马澜婧	第四军医大学西京消化病医院肿瘤生物学国家重点实验室	2	0	0.0	0.0
6	刘巧云	第四军医大学西京消化病医院肿瘤生物学国家重点实验室	1	0	0.0	0.0