山楂PCR－SSCP反应体系与反应条件的优化

• 作者: 撒云俐 那冬晨
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 山楂 PCR-SSCP 引物 反应体系 反应条件
• 年，卷（期）: 2016,（33）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 137-139,142
• 页数: 4页
• 分类号: S188
• 字数: 3210字
• 语种: 中文

摘要

[目的]优化山楂PCR－SSCP反应体系与反应条件。[方法]以山楂为材料，采用改良的 CTAB 法分步提取叶绿体DNA和核DNA，对PCR－SSCP引物进行筛选，同时进行PCR－SSCP反应体系和反应条件的优化，琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物，非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测变性后的PCR扩增产物。[结果] ropB、ropL、rpoC1、ITS2、psbA－trnH 5对引物适用于山楂PCR－SSCP分析。电泳时，采用6％聚丙烯酰胺凝胶（交联度29∶1），4℃恒温，200 V恒压，上样缓冲液（不含甘油）与PCR产物等量混合，98℃碱（1％NaOH）变性15 min，电泳缓冲液为0．5×TBE，电泳3～4 h可得到较好的山楂PCR－SSCP电泳图谱。[结论]建立了山楂PCR－SSCP最优反应体系与反应条件，为山楂SSCP分析奠定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	那冬晨	山西师范大学生命科学学院	27	97	6.0	9.0
2	撒云俐	山西师范大学生命科学学院	2	2	1.0	1.0