红花bZIP20转录因子基因的克隆、表达分析及植物表达载体构建

• 作者: 官丽莉 崔琪 李校堃 李海燕 杜林娜 武云云 胡人阁 韩怡来 顾天瑶
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 红花 bZIP20基因 表达分析 RT-PCR 植物表达载体
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 1369-1374
• 页数: 6页
• 分类号: R282.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2016.08.021

摘要

目的 克隆红花花瓣中bZIP20 (Basic region/leucine zipper motif)基因,研究其在不同组织中的表达量并构建其植物表达载体.方法 根据红花转录组测序结果挑选bZIP基因的设计引物,以红花花瓣总RNA为模板,采用RT-PCR法扩增bZIP20基因开放阅读框(ORF)片段,利用RT-PCR法分析在红花不同组织以及尖孢镰刀菌侵染后红花根部bZIP20基因的表达量,同时构建植物表达载体pBASTA-bZIP20.结果 bZIP20基因ORF长981 bp,编码326个氨基酸(GenBank登录号为KT692605).红花bZIP20与其他物种氨基酸具有一定的同源性,其与芝麻、野茶树的氨基酸序列相似性高达85.41％和83.99％.实时荧光定量PCR分析表明,bZIP20基因在不同组织中的表达水平具有显著差异,在花中呈现高表达,而在其他组织中低表达.接种尖孢镰刀菌的红花根部组织中bZIP20基因的表达显著上调.结论 成功地对bZIP20基因进行克隆及表达分析,并构建植物表达载体pBASTA-bZIP20.