荧光PCR和数字PCR法检测转基因DAS-44406-6品系大豆

• 作者: 于晓帆 孙敏 李荣贵 肖西志 高宏伟
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 农学
• 关键词: 转基因大豆 DAS-44406-6品系 品系鉴定 实时荧光PCR 数字PCR
• 年，卷（期）: 2016,（16）
• 所属期刊栏目: 安全检测
• 页码范围: 235-241
• 页数: 7页
• 分类号: S565.1
• 字数: 6350字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201616038

摘要

目的:建立实时荧光聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测转基因DAS-44406-6品系大豆的定性检测方法和使用数字PCR检测转基因DAS-44406-6品系大豆的定量检测方法.方法:针对转基因DAS-44406-6大豆品系,进行5'-RACE,测定该品系转基因大豆外源片段与大豆染色体重组的边界序列,并根据该边界序列设计引物和探针.使用23种非DAS-44406-6品系转基因植物作为阴性对照测试实时荧光PCR引物和探针的特异性,以DAS-44406-6品系样品制备6个含量梯度的样品进行检测低限实验.使用数字PCR技术进行定量检测,并确定定量检测的低限.结果:建立的转基因DAS-44406-6大豆品系的实时荧光PCR特异性检测方法品系鉴定特异性较强,实时荧光PCR检测方法的检测低限在模板DNA浓度为100 ng/反应时,为0.01％的转基因大豆含量,约为16.6个拷贝的DAS-44406-6基因组DNA;数字PCR检测方法的检测低限在模板DNA浓度为0.5 ng/反应、转基因大豆含量为1％时,相对标准偏差为0.7％.因此,建立的转基因DAS-44406-6大豆品系实时荧光PCR和数字PCR特异性检测方法符合转基因检测的要求.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李荣贵	青岛大学生命科学学院	68	702	13.0	25.0
2	高宏伟	山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心	29	188	8.0	12.0
3	孙敏	山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心	18	118	6.0	10.0
4	肖西志	山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心	22	111	7.0	9.0
5	于晓帆	青岛大学生命科学学院	1	14	1.0	1.0