双抗夹心酶联免疫吸附快速检测冷鲜肉中的6种血清型沙门氏菌

• 作者: 刘慧 张帅 张红星 王怡雯 谢远红 齐颖颖
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 沙门氏菌 杂交瘤技术 单克隆抗体 双抗夹心ELISA
• 年，卷（期）: 2016,（16）
• 所属期刊栏目: 安全检测
• 页码范围: 211-215
• 页数: 5页
• 分类号: TS251.7
• 字数: 4255字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201616034

摘要

为快速检测冷鲜肉中的沙门氏菌,筛选出1株产抗6种沙门氏菌单克隆抗体的细胞株,运用产生的抗体建立酶联免疫吸附检测方法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA).实验采用6种血清型致病沙门氏菌制备出混合抗原,对BALB/c小鼠及新西兰大白兔进行免疫,运用杂交瘤技术进行细胞融合,制备出抗沙门氏菌单克隆抗体以及多克隆抗体,并建立双抗夹心ELISA体系检测冷鲜肉中沙门氏菌.结果表明,成功筛选出1株能稳定分泌抗沙门氏菌的单克隆抗体杂交瘤细胞株6E7,保藏编号为CGMCC 10313以及多克隆抗体,效价分别为1∶1.28×106和1∶8.0× 105;将多抗作为包被抗体吸附于96孔酶标板上,并用辣根过氧化物酶标记单抗,建立双抗夹心ELISA体系:检测模拟污染肉样中沙门氏菌,其检测限为800 CFU/g;并与其他血清型沙门氏菌、志贺氏菌、阪崎肠杆菌、大肠杆菌O157∶H7、金黄色葡萄球菌及单增李斯特菌均无交叉反应,特异性良好.