制备小鼠去细胞拟胚体对Lewis肺癌细胞的促分化作用

• 作者: 刘志刚 吕卫东 张家东 张新伟 蔡琳 陆建荣 雷光焰
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织工程 胚胎 去细胞 拟胚体 Lewis肺癌细胞 细胞外基质 生物材料 三维支架 三维培养 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2016,（20）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 组织构建细胞学实验
• 页码范围: 2972-2978
• 页数: 7页
• 分类号: R318
• 字数: 5263字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.20.012

摘要

背景：胚胎干细胞或胚胎组织与癌细胞共培养，能够诱导癌细胞分化为正常上皮细胞或恶性程度降低，而去细胞拟胚体保留了胚胎组织的结构和重要细胞因子。<br>　　目的：成功制备一种来源于小鼠胚胎干细胞的去细胞拟胚体，探讨去细胞拟胚体在小鼠 Lewis 肺癌细胞体外三维培养中的作用。<br>　　方法：先将小鼠胚胎干细胞(D3)动态培养7 d后形成拟胚体，然后用十二烷基硫酸钠进行去细胞处理。小鼠Lewis肺癌细胞与去细胞拟胚体三维共培养7 d，对照组肺癌细胞在Matrigel上三维培养7 d。Ki67免疫组化染色检测细胞增殖情况，Western blot检测Paxilin，E-cadherin蛋白表达水平，RT-PCR检测Slug和E-cadherin mRNA表达水平。<br>　　结果与结论：①实验成功制备一种大小均匀的小鼠拟胚体，经十二烷基硫酸钠去细胞处理后，拟胚体的细胞成分完全去除；②小鼠Lewis肺癌细胞在Matrigel上三维培养7 d后形成球形的肿瘤多细胞球体， Ki67免疫组化染色阳性细胞比例高；小鼠Lewis肺癌细胞在去细胞拟胚体支架上三维培养7 d，可见肺癌细胞长入拟胚体，但Ki67阳性细胞比例明显降低；③相对于Matrigel组，去细胞拟胚体组的Paxil in吸光度小于Matrigel组(P<0.05)，而E-cadherin吸光度大于Matrigel组(P<0.05)；④去细胞拟胚体组的Slug mRNA表达明显低于Matrigel组(P<0.05)，而E-cadherin mRNA表达高于Matrigel组(P<0.05)；⑤结果表明，去细胞拟胚体对小鼠Lewis肺癌细胞在体外三维培养有促进分化作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	雷光焰	陕西省肿瘤医院胸外科	42	162	7.0	11.0
2	陆建荣	陕西省肿瘤医院病理科	23	53	4.0	6.0
3	吕卫东	陕西省肿瘤医院胸外科	10	19	2.0	4.0
4	蔡琳	陕西省肿瘤医院病理科	16	34	4.0	4.0
5	张家东	陕西省肿瘤医院胸外科	2	1	1.0	1.0
9	刘志刚	陕西省肿瘤医院胸外科	9	20	2.0	4.0
10	张新伟	陕西省肿瘤医院胸外科	4	4	1.0	2.0