肝癌高转移细胞株的肿瘤干细胞生物学特性研究

• 作者: 冉宇靓 刘军 刘辉琦 孙力超 杨治华 舒雄 遇珑
• 来源期刊: 现代肿瘤医学
• 学科: 医学
• 关键词: 人肝癌细胞 肿瘤干细胞 靶向治疗 ESA CD90
• 年，卷（期）: 2016,（14）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 2175-2179,2180
• 页数: 6页
• 分类号: R730.5|R735.7
• 字数: 5082字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-4992.2016.14.001

摘要

目的：建立高转移肝癌细胞株，研究其肿瘤干细胞生物学特征，为靶向人肝癌干细胞治疗提供有价值的细胞模型。方法：肝癌细胞系 Bel7402接种裸鼠皮下，成瘤后，取小鼠肺部转移灶，通过机械分离法，获取肺部肝转移细胞，体外扩大培养后，再次接种裸鼠。如此反复接种裸鼠，获得稳定肺转移肝癌细胞株 Bel7402- V13。采用无血清悬浮培养及 PKH26染色确定 Bel7402- V13中肿瘤干细胞的存在。流式细胞术分析亲本Bel7402和 Bel7402- V13中肿瘤干细胞标志物 ESA 的表达情况，分选 Bel7402和 Bel7402- V13中 ESA +细胞并进行体外生物学特征研究及裸鼠致瘤实验。结果：建立高转移 Bel7402- V13细胞株，Bel7402- V13细胞无血清悬浮培养7d 后形成的细胞球体中存在单个 PKH26阳性细胞。与 Bel7402中 ESA +细胞相比，流式分析显示干细胞标志物 ESA 比例高转移 Bel7402- V13显著提高5.67倍（17.6±0.4 vs 3.1±1.5）。Bel7402-V13中 ESA +细胞具有更强的自我更新能力[成球率：（94.8±7.5）% vs（52.3±6.9）%，P <0.01]，侵袭能力提高1.51倍（397.7±79.4 vs 262.0±40.1，P <0.01），耐药能力也显著增强（IC50：0.286 vs 0.196，P <0.01）， ESA +细胞 Bel7402- V13在裸鼠皮下接种2×102个细胞3月即可致瘤（3/6），而接种2×102个 ESA +细胞Bel7402细胞3月才能致瘤（1/6）。结论：获得高转移肝癌细胞株 Bel7402- V13，伴随 ESA +细胞增加，其体内外功能显著增强，为肝癌干细胞的靶向治疗提供有价值的细胞模型。