基于Caco-2细胞的外源核酸吸收模型的建立及其吸收机制

• 作者: 吴薇 张艳芳 李敬 李春川 梁兴国 王倩 王晓倩 董平 高晓梦
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: Caco-2细胞模型 外源核酸 吸收机制 质粒DNA
• 年，卷（期）: 2016,（23）
• 所属期刊栏目: 营养卫生
• 页码范围: 236-241
• 页数: 6页
• 分类号: TS201.4
• 字数: 4975字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201623039

摘要

基于人结肠癌细胞系Caco-2细胞建立外源核酸的吸收模型,并在此模型的基础上探究质粒DNA的肠道吸收机制.在Transwell孔膜上培养Caco-2细胞21d后,通过透射电子显微镜观察细胞形态、监测培养期间跨膜电阻(transepithelial electrical resistance,TEER)值、测定荧光黄透过率评价细胞模型是否成功建成;通过细胞毒性实验探究质粒对细胞生长的影响;将质粒DNA加入细胞模型中进行双向转运实验,探究质粒的肠道吸收规律;在低温和添加特异性抑制剂条件下进行质粒转运实验,进一步推测质粒的肠道吸收机制.结果表明,细胞分化形态良好、TEER值及荧光黄表观透过系数(apparent permeability coefficient,Papp)均符合要求,细胞模型可用于转运实验;质粒对细胞生长无显著抑制作用,可用于转运实验;随着时间的延长,质粒在模型两方向上的转运均呈逐渐饱和趋势,Papp(肠腔侧(apical,AP)→基底侧(basolateral,BL))远大于Papp(BL→AP),提示质粒的转运受到某种载体蛋白的介导,膜介导的跨细胞运输方式可能参与其中;在低温和添加特异性抑制剂条件下,质粒的转运均受到显著抑制,进一步表明该过程是一个跨细胞方式的主动运输过程.