弧菌外膜蛋白Ompk基因序列分析及其多克隆抗体的制备

• 作者: 丁承超 刘箐 曾海娟 谢曼曼
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 弧菌 Ompk 原核表达 纯化 多克隆抗体 免疫学检测
• 年，卷（期）: 2016,（23）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 141-146
• 页数: 6页
• 分类号: TS201.3
• 字数: 5152字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201623024

摘要

弧菌外膜蛋白(outer membrane protein,OMP)OmpK不仅可激发机体的体液免疫和细胞免疫,而且可在不同血清型菌株之间产生免疫交叉反应.本研究利用克隆测序和查找GenBank获得20株弧菌的Ompk基因序列并构建Ompk系统进化树,对比分析20株弧菌Ompk基因序列;利用原核表达系统表达野生株Vibrio parahaemolyticus B的OmpK,纯化OmpK后制备兔多克隆抗体;采用酶联免疫吸附分析法和蛋白质印迹法(Western-blotting)分别检测抗体效价和特异性.系统进化树和基因序列比对结果显示Ompk基因在弧菌中高度保守,核苷酸序列相似性在77％以上;原核表达系统成功表达了弧菌OmpK,蛋白经纯化后成功制备的兔多抗效价达1∶16 000;Western-blotting实验证实抗体具有很好的特异性;OmpK多克隆抗体在弧菌中普遍存在免疫交叉性.因此,弧菌Ompk基因序列分析及其抗体研制,不仅为弧菌快速免疫学检测提供可能性,也为以OmpK为靶点的水产疫苗研制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢曼曼	上海理工大学医疗器械与食品学院	19	46	4.0	6.0
2	刘箐	上海理工大学医疗器械与食品学院	64	204	7.0	11.0
3	曾海娟	上海理工大学医疗器械与食品学院	14	40	4.0	5.0
4	丁承超	上海理工大学医疗器械与食品学院	23	62	5.0	6.0