小鼠骨髓来源调节性树突状细胞的体外诱导分化及鉴定

• 作者: 乔磊 刘义 张晓宁 李光 李克秋 王进京 袁晶华
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 调节性树突状细胞 器官移植 免疫耐受 细胞培养 穿孔素 颗粒酶B
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 13-16
• 页数: 4页
• 分类号: R392.4
• 字数: 2284字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2016.10.005

摘要

目的 建立小鼠骨髓来源调节性树突状细胞(DCreg)体外诱导培养和扩增的方法,并进行生物学及功能鉴定.方法 取小鼠骨髓单个核细胞(BM-MNCs),用重组小鼠白细胞介素4(rmIL-4)及重组小鼠粒-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)诱导分化,第6天细胞中含大量DCreg;取部分细胞加脂多糖(LPS),继续培养2 d(第8天)分化为成熟DC(mDC).观察培养过程中细胞形态变化,流式细胞术检测DCreg特异性表面分子CD11b和共刺激分子CD40、CD86.取小鼠脾脏分离的CD8+T细胞,随机分为3组;A、B组将细胞分别与DCreg、mDC以5:1、10:1、20:1混合培养4 d,C组细胞不处理.采用CFSE标记法检测CD8+T细胞增殖情况,Real-time PCR检测CD8+T细胞免疫功能分子穿孔素(Prf1)和颗粒酶B(GzmB)mRNA.结果 新分离的BM-MNCs呈圆形,体积较小;诱导第6天细胞集落数量增多,体积增大,细胞表面突起增多,CD11b阳性细胞比例达96.1%±2.7%.与mDC相比,DCreg中CD40、CD86表达阳性率降低(P均<0.05).与B组比较,A组细胞增殖率降低(P均<0.05);与B、C组比较,A组Prf1、GzmB mRNA表达量降低(P均<0.05),与C组比较,B组GzmB mRNA表达量升高(P均<0.05).结论 rmGM-CSF联合rmIL-4可成功诱导小鼠BM-MNCs向DCreg分化,且纯度高,并具有免疫抑制功能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李光	天津医科大学基础医学院	62	207	9.0	11.0
2	刘义	天津医科大学基础医学院	6	4	1.0	2.0
3	李克秋	天津医科大学基础医学院	41	123	7.0	9.0
4	乔磊	天津医科大学基础医学院	4	36	2.0	4.0
5	王进京	天津医科大学基础医学院	6	91	4.0	6.0
6	张晓宁	天津医科大学基础医学院	3	6	2.0	2.0
7	袁晶华	天津医科大学基础医学院	3	0	0.0	0.0