抗Dysbindin-1多肽双抗夹心ELISA的建立及在肝癌中的应用

• 作者: 宋朝君 王毅超 谢姣贵 赵宁 郭欣 陈勇
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: Dysbindin-1 单克隆抗体 DAS-ELISA 肝癌
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2022-2026,2044
• 分类号: R735.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2016.11.006

摘要

目的:制备抗人Dysbindin-1特异性单克隆抗体,建立DAS-ELISA检测体系,并初步应用于肝癌血清的检测.方法:采用合成免疫原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术制备抗Dysbindin-1单克隆抗体,用HRP标记单克隆抗体,ELISA和SDS-PAGE电泳法检测抗体的亚类、滴度;采用DAS-ELISA技术制备Dysbindin-1检测试剂盒,检测正常、肝硬化及肝癌患者各30例血清并比较其差异.结果:细胞融合后获得了4株稳定产生抗Dysbindin-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1C6A11、1E8H3、2D1C11、5B6D4),抗体亚类分别为IgG2b,IgG2b,IgG1和IgG2a,杂交瘤细胞诱生的腹水抗体效价这106以上,通过抗体配对实验筛选确定2D1C11作为包被抗体,1E8H3作为酶标抗体.该ELISA方法线性范围为62.5-1000 ng/mL,检测限为62.5 ng/mL;应用该方法检测显示正常组与肝硬化组及肝癌组间差异显著(P＜0.001),Dysbindin-1诊断肝癌的敏感性和特异性分别为90％和93.3％.结论:Dysbindin-1可以成为新的候选的肝癌血清标志物,抗Dysbindin-1多肽双抗夹心ELISA体系可以初步应用于肝癌的早期诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋朝君	第四军医大学基础部免疫学教研室	54	195	7.0	11.0
2	陈勇	第四军医大学西京医院肝胆胰脾外科	72	254	9.0	11.0
3	赵宁	第四军医大学生物技术中心	35	228	10.0	13.0
4	郭欣	第四军医大学西京医院肝胆胰脾外科	10	17	3.0	4.0
5	王毅超	天津医科大学医学检验学院	3	11	1.0	3.0