黑豆脂氧合酶的制备及其酶学活性的鉴定

• 作者: 崔晓东 李晨 李玉英 李茹 王转花
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 黑豆 脂氧合酶 β-葡萄糖苷酶活性 花色苷 花色素
• 年，卷（期）: 2016,（9）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 155-159
• 页数: 5页
• 分类号: Q554
• 字数: 4575字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201609029

摘要

从黑豆种子中分离纯化1种黑豆脂氧合酶——bsLOX,对其酶学活性及降解花色苷等性质进行初步研究.采用缓冲液抽提、硫酸铵沉淀、透析、阳离子交换层析及凝胶层析等方法纯化出具有β-葡萄糖苷酶活性的bsLOX;分别以亚油酸钠和对硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(p-nitrophenyl β-D-glucopyranoside,pNPG)为反应底物鉴定bsLOX的脂氧合酶活性和β-葡萄糖苷酶活性.从黑豆种子中纯化获得的bsLOX在十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)图谱显示单一条带,分子质量约为95 kD.酶活性分析表明,纯化的bsLOX以亚油酸钠为底物时,酶活力为13 U/mL;当以pNPG为底物在405 nm波长处检测到了对硝基苯酚的生成,从而推测bsLOX具有β-葡萄糖苷酶活性.高效液相色谱实验结果表明bsLOX可以降解花色苷(矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷)为花色素(矢车菊素、矮牵牛素).由于降解作用不完全,继而发现花色素能抑制bsLOX的酶活性.bsLOX是黑豆中的一种兼具β-葡萄糖苷酶功能的蛋白质,而花色素可能是天然的bsLOX抑制剂.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李茹	山西大学生命科学学院	99	683	13.0	21.0
2	李晨	山西大学生命科学学院	22	83	5.0	8.0
3	李玉英	山西大学化学生物学与分子工程教育部重点实验室	34	196	8.0	13.0
4	王转花	山西大学生命科学学院	68	733	13.0	26.0
8	崔晓东	山西大学化学生物学与分子工程教育部重点实验室	24	65	4.0	8.0