三联组氨酸核苷酸结合蛋白2启动子报告基因质粒的构建和活性鉴定

• 作者: 蔡少鑫 许呈扬
• 来源期刊: 海峡药学
• 学科: 医学
• 关键词: Hint2 启动子 荧光素酶
• 年，卷（期）: 2016,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 252-254
• 页数: 3页
• 分类号: R969.4
• 字数: 2196字
• 语种: 中文

摘要

目的 三联组氨酸核苷酸结合蛋白2(Hint2,histidine triad nucleotide binding protein 2)在肝癌组织中低表达并与临床病理分期和病人预后密切相关,为研究Hint2的基因表达调控,构建人Hint2启动子荧光素酶报告基因质粒并鉴定活性.方法 提取人基因组DNA,以其为模板,将含有Hint2启动子的不同长度的片段插入荧光素酶质粒pGL3-basic,后与β-半乳糖苷酶共转染HeLa细胞,转染后24h通过β-半乳糖苷酶实验检测转染效率,通过荧光素酶实验检测转录活性.结果 质粒pGL3-h1(-6--463,457bp),pGL3-h2(-6--1255,1249bp)构建成功后,与 β-半乳糖苷酶共转染人子宫颈癌HeLa细胞.转录活性=荧光素酶值/β-半乳糖苷酶值,结果 显示pGL3-basic荧光素酶值/β-半乳糖苷酶值为147.3272,而pGL3-h1为67936,pGL3-h2为64234.19.空质粒与pGL3-h1,pGL3-h2之间差异具有统计学意义,而pGL3-h1,pGL3-h2之间差异不具有统计学意义.结论 Hint2位于转录起始位点上游-6至--463之间的启动子区域具有强转录活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡少鑫	福建省立医院肿瘤外科	2	2	1.0	1.0
2	许呈扬	福建省立医院药学部	9	26	3.0	4.0