猪心脏瓣膜成肌纤维细胞的分离、鉴定与培养

• 作者: 刘凤丹 李永胜 胡伟林 陈正平
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织工程 瓣膜钙化 瓣膜间质细胞 成年猪 成肌纤维细胞 平滑肌细胞 细胞培养 分离 纯化 细胞鉴定 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2016,（51）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 组织构建细胞学实验
• 页码范围: 7684-7689
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 6238字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.51.013

摘要

背景：瓣膜间质细胞是心脏瓣膜中的主要细胞成分，成肌纤维细胞是一种能够表达平滑肌α-平滑肌肌动蛋白和Ⅰ型胶原纤维，并具有一定分化潜能的重要的瓣膜间质细胞，不仅在瓣膜的结构中起着支架作用，尤其在瓣膜的正常生理以及病理应答过程中发挥着重要的调控作用。<br>　　目的：建立一套可靠的心脏瓣膜成肌纤维细胞分离、原代培养与鉴定的方法，为心瓣膜钙化等疾病的进一步研究奠定基础。<br>　　方法：①从猪心中获取主动脉辨，分别用酶联和消化法、普通酶消化法以及组织块种植法提取猪主动脉瓣瓣膜成肌纤维细胞，进行原代培养；②显微镜观察3种方法培养出的成肌纤维细胞的活性和形态；③用光学显微镜和免疫细胞化学方法鉴定细胞。<br>　　结果与结论：①3种方法中，利用胰酶和胶原酶Ⅱ联合消化，然后迅速终止消化的方法获得成肌纤维细胞的活性更高，状态更好，纯度更高；②在荧光显微镜下，观察到获得的主动脉瓣成肌纤维细胞α-平滑肌肌动蛋白染色阳性，抗血管性血友病因子染色阴性，提示培养的细胞为成肌纤维细胞。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李永胜	华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科	34	341	11.0	18.0
2	刘凤丹	华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科	3	33	1.0	3.0
3	陈正平	华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科	2	33	1.0	2.0
4	胡伟林	华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科	2	1	1.0	1.0