大鼠血浆中重组人钙调磷酸酶B亚基的ELISA双抗体夹心法测定及其药动学研究Δ

• 作者: 林春华 田树红 符江 谢学立 谭鹏 邢俊 邢桂兰 邵继平 韩克胜
• 来源期刊: 中国药房
• 学科: 医学
• 关键词: rhCNB多肽 酶联免疫吸附双抗体夹心法 大鼠 定量检测 药动学
• 年，卷（期）: 2016,（25）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 3468-3470
• 页数: 3页
• 分类号: R927.2
• 字数: 3220字
• 语种: 中文
• DOI: 10.6039/j.issn.1001-0408.2016.25.04

摘要

目的：建立大鼠血浆中重组人钙调磷酸酶B亚基（rhCNB）的测定方法，并研究其药动学特征。方法：采用酶联免疫吸附（ELISA）双抗体夹心法，将1μg/ml的rhCNB单克隆抗体mAb包板，加入待测样品，再加入rhCNB多克隆抗体pAb（稀释比例为1∶5000）和辣根过氧化酶（HRP）标记抗免疫球蛋白G（IgG）（稀释比例为1∶10000），以四甲基联苯胺显色，用酶标仪在450 nm波长处测定吸光度（OD值）。测定6只大鼠iv 2.5 mg/kg rhCNB后2、15、30、60、120、240、480、720 min的血药浓度，以BAPP 3.0软件计算药动学参数。结果：rhCNB检测质量浓度的线性范围为0.195～12.5 ng/ml（r2＝0.9950），定量下限为0.195 ng/ml，准确度为97.300％～103.622％（RSD均小于7.5％，n＝6）；批内、批间和反复冻融3次的RSD均不大于8.5％（n＝6、18、15）。该药在大鼠体内的药动学特征符合二室模型，AUC0-720 min为173.038 mg·min/L、t1/2为94.62 min。结论：建立的方法特异性强、灵敏度高、准确度及精密度好，可用于生物样品中rhCNB的定量检测和药动学研究。