一种高纯度小鼠原代脑微血管内皮细胞的分离培养方法

• 作者: 崔桂云 张作慧 花放 陈晨 陈浩
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 血管内皮细胞 脑微血管内皮细胞 小鼠 原代培养 形态学 细胞免疫荧光 CD31 Claudin-5 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2016,（51）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 组织构建细胞学实验
• 页码范围: 7666-7671
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 4698字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.51.010

摘要

背景：脑微血管内皮细胞是神经科学研究领域的重要工具细胞，如何获得高纯度的脑微血管内皮细胞一直是体外研究的关键和难点。<br>　　目的：探索一种简便易操作，高纯度的原代脑微血管内皮细胞的分离培养方法。<br>　　方法：使用6-8周龄C57BL/6小鼠，经酶消化及梯度离心法获得微血管段，使用药物进一步纯化内皮细胞，利用CD31和GFAP免疫荧光染色鉴定内皮细胞纯度。使用Claudin-5免疫荧光染色鉴定紧密连接蛋白的表达情况。<br>　　结果与结论：①细胞呈旋涡状或铺路石样排列、生长；②免疫荧光显示内皮细胞纯度达99%以上，并广泛表达紧密连接蛋白；③结果表明，实验建立了一种简便、易操作的，可以获得大量高纯度的原代小鼠脑微血管内皮细胞的培养方法。