α干扰素通过 p53依赖性通路增强阿霉素诱导的骨肉瘤细胞凋亡

• 作者: 原向伟 廖威明 梁胜根 陈忠羡 黄秀芳
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: 骨肉瘤 α干扰素 阿霉素 蛋白质 p53 凋亡
• 年，卷（期）: 2016,（37）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3008-3013
• 页数: 6页
• 字数: 4389字
• 语种: 中文

摘要

目的：探讨α干扰素（IFNα）对阿霉素诱导骨肉瘤细胞凋亡的影响及其分子机制。方法采用α干扰素（IFN）和阿霉素单独或联合处理骨肉瘤 U2OS 和 MG63细胞72 h，通过 MTT 法测定细胞生长抑制，应用流式细胞术、Hochest 33258荧光染色和 DNA Ladder 检测细胞凋亡，免疫印迹法检测聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶（PARP）、凋亡相关蛋白（p53、Bax、Bcl－2、Mdm2、p21、Caspase－3）和PARP 的表达，实时聚合酶链反应（RT－PCR）检测 p53在 mRNA 水平的表达，通过 siRNA 干扰进行 p53的表达沉默。结果IFNα本身对 U2OS 和 MG63无细胞毒作用，但在 p53正常的 U2OS 而非 p53突变的 MG63细胞中增强阿霉素引起的细胞毒作用和凋亡，在 IFNα＋阿霉素组的 U2OS 细胞出现更明显的凋亡形态学改变和 DNA 梯形条带。在 U2OS 细胞中，IFNα对各基因的表达无影响，p53、Bax、Mdm2、p21可被阿霉素上调，并被联合用药进一步增强。而 Bcl－2在阿霉素作用后下调，并被联合用药进一步下调，在 MG63细胞中，各基因的表达无明显变化。在 U2OS 细胞中转染 p53－siRNA 阻断了p53的表达，经联合用药处理72 h 后，较空白组和对照 siRNA 组，转染 p53－siRNA 组的细胞活力明显增高明显，并且相对于对照 siRNA 组，联合用药引起的 caspase－3和 PARP 的活化也在 p53－siRNA 组明显减弱。结论IFNα可通过 p53依赖性凋亡途径增强阿霉素诱导的骨肉瘤细胞凋亡，联合 IFNα生物治疗和化疗可望应用于骨肉瘤的治疗。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	廖威明	中山大学附属第一医院关节外科	148	822	14.0	19.0
2	原向伟	中山大学附属江门医院脊柱骨科	20	34	3.0	4.0
3	黄秀芳	中山大学附属江门医院病理科	16	25	3.0	3.0
4	陈忠羡	中山大学附属江门医院脊柱骨科	17	21	3.0	3.0
5	梁胜根	中山大学附属江门医院脊柱骨科	12	16	3.0	3.0