miR-2135对P19细胞增殖及向心肌细胞分化的作用

• 作者: 李辉
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 分化 增殖 miR-2135 P19细胞 细胞周期 先天性心脏病
• 年，卷（期）: 2016,（45）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 干细胞培养与分化
• 页码范围: 6814-6820
• 页数: 7页
• 分类号: R394.2
• 字数: 6108字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.45.019

摘要

背景：既往研究发现，向心肌分化P19细胞中的miR-2135表达水平显著高于未分化P19细胞，但miR-2135对P19细胞增殖、向心肌细胞分化和心脏发育的影响尚不明确。<br>　　目的：探索miR-2135对P19细胞增殖及向心肌细胞分化的影响。<br>　　方法：分别以miR-2135沉默及空载质粒转染P19细胞，培养0-4 d，MTT法检测细胞增殖；培养0，24，48 h，流式细胞仪检测细胞周期。诱导两组转染的P19细胞向心肌细胞分化，诱导第0，10天，采用qRT-PCR检测P19细胞中miR-2135的表达；诱导第10天，采用蛋白免疫印迹检测心肌分化相关标志物心肌肌钙蛋白T、心房钠尿肽和心肌转录因子的表达。<br>　　结果与结论：①转染结果：转染miR-2135沉默质粒的P19细胞低表达miR-2135；②细胞增殖与周期：miR-2135沉默质粒转染P19细胞的增殖速度快于空载质粒转染P19细胞(P<0.05)，培养24，48 h的S期细胞比例明显高于空载质粒转染P19细胞(P<0.05)；③qRT-PCR检测结果：miR-2135沉默质粒转染P19细胞诱导10 d的miR-2135表达明显高于诱导0 d水平(P<0.01)；④蛋白免疫印迹检测结果：诱导10 d，miR-2135沉默质粒转染P19细胞心肌肌钙蛋白T、心房钠尿肽和心肌转录因子的表达明显低于空载质粒转染P19细胞；⑤结果表明：miR-2135抑制P19细胞的增殖，可促进其向心肌细胞分化。