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摘要:
背景:有学者采用基因转染的方法诱导脂肪间充质干细胞向软骨细胞分化,使种子细胞能够稳定合成和分泌特定的细胞因子,从而达到长期稳定刺激种子细胞增殖、分化和软骨形成的目的。<br>  目的:观察胰岛素样生长因子1基因转染对兔脂肪间充质干细胞低氧诱导因子1α和Sox-9表达的影响。<br>  方法:①取成年新西兰大耳白兔颈后部皮下脂肪组织,分离、培养兔脂肪间充质干细胞,免疫荧光法鉴定后在脂质体介导下应用pcDNA3.1-IGF-1基因转染脂肪间充质干细胞,G418筛选,获得稳定转染的细胞株;②实验分为3组:正常传代培养的脂肪间充质干细胞;转染pcDNA3.1的脂肪间充质干细胞;转染pcDNA3.1-IGF-1的脂肪间充质干细胞。③RT-PCR及Western blot法检测转染后细胞中胰岛素样生长因子1的表达,MTT法绘制细胞增殖曲线,Dil荧光染料标记后计数细胞增殖效率,免疫荧光法分析转染后细胞低氧诱导因子1α和Sox-9的表达情况,DMMB定量测定总糖胺聚糖含量。<br>  结果与结论:①成功构建稳定表达pcDNA3.1-IGF-1的细胞株,RT-PCR及Western blot检测证实转染后的细胞株在mRNA水平上获得胰岛素样生长因子1的表达,并且成功翻译为蛋白;②MTT提示转染后细胞增殖活性增强;③胰岛素样生长因子1基因转染显著提高Dil标记脂肪间充质干细胞的增殖效率;④转染后细胞的低氧诱导因子1α和Sox-9表达阳性;⑤胰岛素样生长因子1基因转染组糖胺聚糖含量明显高于其他2组(P<0.01)。⑥结果说明,胰岛素样生长因子1基因转染能够能够有效促进脂肪间充质干细胞增殖,促使阳性表达低氧诱导因子1α和成软骨分化调控基因Sox-9,并有效促进细胞分泌软骨细胞外基质糖胺聚糖。
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内容分析
关键词云
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文献信息
篇名 调控脂肪间充质干细胞成软骨分化基因Sox-9和低氧诱导因子1α的表达
来源期刊 中国组织工程研究 学科 医学
关键词 干细胞 脂肪干细胞 胰岛素样生长因子1 脂肪间充质干细胞 低氧诱导因子1 SOX-9 辽宁省自然科学基金
年,卷(期) 2016,(45) 所属期刊栏目 研究与报告 -- 脂肪干细胞
研究方向 页码范围 6766-6773
页数 8页 分类号 R394.2
字数 7854字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.45.012
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 李建军 中国医科大学附属盛京医院创伤骨科 92 475 11.0 16.0
2 杨军 中国医科大学附属盛京医院创伤骨科 398 1853 18.0 26.0
3 张传辉 朝阳市中心医院骨外科 5 21 3.0 4.0
传播情况
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节点文献
干细胞
脂肪干细胞
胰岛素样生长因子1
脂肪间充质干细胞
低氧诱导因子1
SOX-9
辽宁省自然科学基金
研究起点
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相关学者/机构
期刊影响力
中国组织工程研究
旬刊
2095-4344
21-1581/R
大16开
沈阳浑南新区10002信箱
8-584
1997
chi
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