构建HSA-PEI-pcDNA-Apoptin复合物及对乳腺癌细胞增殖的影响

• 作者: 刘逸之 吕卫东 常柏玲 赵新汉
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 实验动物 细胞损伤与修复模型 凋亡素 乳腺癌 增殖 基因治疗 人血清白蛋白 载体 细胞凋亡 细胞转染 体外培养 陕西省自然科学基金
• 年，卷（期）: 2016,（49）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 细胞损伤与修复模型
• 页码范围: 7425-7430
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 4294字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.49.019

摘要

背景：凋亡素(Apoptin)能诱导50种以上不同类型的肿瘤细胞凋亡，有望成为一种极具应用前景的抗肿瘤制剂。如何安全、有效地将其应用于临床，是一个亟待解决的最具现实意义的问题。<br>　　目的：拟制备人血清白蛋白(HSA)与Apoptin基因的复合物，通过体内外实验验证其抗瘤效果，为Apoptin尽早应用于基因治疗寻找一个简单有效的转移方式。<br>　　方法：①构建含Apoptin基因的真核表达载体pcDNA-Apoptin。以水溶性碳二亚胺(EDC)为交联剂，将聚醚酰亚胺(PEI)与人血清白蛋白(HSA)连接，合成HSA-PEI复合物，然后经电荷中和效应将HSA-PEI复合物与pcDNA-Apoptin重组体及pcDNA空载体分别连接，形成相应HSA-PEI-pcDNA-Apoptin复合物；②将HSA-PEI-pcDNA-Apoptin复合物转染乳腺癌MCF-7细胞，Western blot检测Apoptin基因在细胞中的表达，MTT法和流式细胞术检测转染后细胞增殖情况；③建立裸鼠乳腺癌模型，使用尾静脉注射法，分别将0.5 mL HSA-PEI-pcDNA-Apoptin、HSA-PEI-pcDNA及生理盐水注射入裸鼠体内，4周后测量肿瘤体积。<br>　　结果与结论：①成功构建并鉴定了HSA-PEI-pcDNA-Apoptin复合物，体外成功转染乳腺癌MCF-7细胞；②HSA-PEI-pcDNA-Apoptin转染MCF-7细胞24 h有Apoptin蛋白的表达，而转染HSA-PEI-pcDNA细胞及空白对照组细胞未见Apoptin蛋白的表达；③体外细胞增殖实验提示HSA-PEI-pcDNA-Apoptin组吸光度值明显低于 HSA-PEI-pcDNA 组及空白对照组(P <0.05)；④裸鼠乳腺癌模型HSA-PEI-pcDNA-Apoptin组肿瘤体积小于HSA-PEI-pcDNA组及空白对照组(P<0.05)；⑤结果表明， HSA-PEI-pcDNA-Apoptin复合物有明显的抑制肿瘤作用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵新汉	西安交通大学第一附属医院肿瘤内科	61	286	9.0	13.0
2	常柏玲	陕西省肿瘤医院肿瘤内科	9	12	3.0	3.0
3	刘逸之	陕西省肿瘤医院肿瘤内科	10	32	3.0	5.0
4	吕卫东	陕西省肿瘤医院胸外科	10	19	2.0	4.0