杂优-2平菇漆酶的分离纯化及酶学性质

• 作者: 唐云明 唐菁 廖海君 李蕊伽 白亚娟 陶敏
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 杂优-2平菇 漆酶 分离纯化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2016,（19）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 147-153
• 页数: 7页
• 分类号: Q946.5
• 字数: 6406字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201619025

摘要

将杂优-2平菇菌丝进行液体培养，发酵液经硫酸铵分级沉淀、DEAE（diethylaminoethyl）-Sepharose fast flow层析和Superdex-200 prep grade层析等方法纯化，获得了电泳纯的杂优-2平菇漆酶，并对纯化的漆酶进行了部分酶学性质研究。结果显示，杂优-2平菇漆酶比活力为115 U/mg，分子质量约为244.0 kD，亚基分子质量约为85.6 kD。最适反应pH值和最适反应温度分别为5.0和55℃，在pH 6.0～8.0及40～55℃范围内稳定性较好；最适条件下，以2,2’-联氮-二（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）为底物的Km值为2.1 mmol/L，最大反应速率（vmax）为0.117μmol/（min·L）。Fe2＋、抗坏血酸对该酶活性具有完全抑制作用，乙二胺四乙酸、Ag＋、Mg2＋、Li＋对该酶活性影响较小；草酸、甲醇、正丁醇、K＋、Ca2＋、Ba2＋、Zn2＋、Cd2＋、Pb2＋、Mn2＋、Co2＋对该酶活性有不同程度的抑制作用；Cu2＋激活作用不明显；尿素、乙醇、异丙醇对该酶活性具有激活作用。