人Arresten基因真核表达质粒的构建

• 作者: 刘兆轩 孟庆义 曹凯 王瑞华 王荣飞
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: Arresten基因 表皮生长因子受体质粒 真核 酶切 血管狭窄
• 年，卷（期）: 2016,（30）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 25-27
• 页数: 3页
• 分类号: R318.0
• 字数: 2239字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2016.30.007

摘要

目的 构建人Arresten基因的真核表达质粒.方法 设计人Arresten基因引物序列,取100 mg新鲜的胎盘组织提取总RNA,采用RT-PCR法扩增Arresten基因.将获取的Arresten基因片段和pIRES2-EGFP质粒分别用BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ作双酶切,将酶切产物与质粒连接,转化感受态大肠杆菌DH-5α进行真核表达.采用酶切、菌液PCR及测序的方法检测Arresten基因真核表达质粒构建的正确性.结果 经双酶切鉴定,得到1条约700 bp的片段和1条与pIRES2-EGFP空载体(5.3 kb)相近的片段,符合Arresten基因重组质粒大小.经重组质粒的菌液PCR鉴定,7组菌液均扩增出700 bp大小的扩增片段,均为阳性克隆.测序结果示,Arresten基因mRNA与GenBank中人Arresten序列完全一致.结论 成功构建了人Arresten基因的真核表达质粒.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王瑞华		32	62	4.0	6.0
2	孟庆义		20	37	4.0	5.0
3	刘兆轩		14	14	2.0	3.0
4	曹凯		1	0	0.0	0.0
5	王荣飞		1	0	0.0	0.0