促红细胞生成素载体的构建、分离纯化及其活性检测

• 作者: 吴晓婷 李永生 潘佳欣 罗亚雄 赵佳浩 高秀峰
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 红细胞生成素 遗传载体 分离和提纯 活性检测
• 年，卷（期）: 2016,（28）
• 所属期刊栏目: 论著·基础研究
• 页码范围: 3913-3915
• 页数: 3页
• 分类号: R34
• 字数: 2457字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2016.28.008

摘要

目的 为了进一步考察促红细胞生成素(EPO)的组织保护作用,构建了高效表达人源性EPO (rhEPO)的原核表达载体,并通过小鼠体内实验考察了其捉红细胞生成活性.方法 构建原核表逸载俸pET30b(+)-rhEPO;转化至大肠杆菌BL21(DE3),获得高效表达重组转化子菌株;Ni-NAT亲和层析纯化融合蛋白;利用网织红细胞指数考察融合蛋白在小鼠体内的促红细胞活性.结果 成功构建pET30b(+)-rhEPO重组子;实现了在原核生物中的表达;纯化后的融合蛋白达到了电泳级纯;其相对分子质量与理论值相符,原核表达的融合蛋白能够显著提高小鼠体内网织红细胞数,可溶性融合蛋白和包涵体蛋白比活性分别是应用化学科1 059.63、727.94 U/mg.结论 构建和表达重组载体pET30b(+)-rhEPO,表达的目的蛋白经分离纯化后具有体内生物学活性,为进一步的功能研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李永生	四川大学化学工程学院	75	302	9.0	13.0
2	高秀峰	四川大学华西基础医学与法医学院	51	202	7.0	11.0
3	潘佳欣	四川大学华西基础医学与法医学院	2	1	1.0	1.0
4	吴晓婷	四川大学华西基础医学与法医学院	3	11	1.0	3.0
5	赵佳浩	四川大学华西基础医学与法医学院	1	0	0.0	0.0
6	罗亚雄	四川大学华西基础医学与法医学院	2	0	0.0	0.0