乙型肝炎病毒阿德福韦酯耐药株（RT A181T）感染性克隆的构建及在 H uh7细胞中的表达

• 作者: 赵建华 陆仁飞
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 关键词: 乙型肝炎病毒 阿德福韦酯 耐药 感染性克隆
• 年，卷（期）: 2016,（23）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3266-3268
• 页数: 3页
• 字数: 3355字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2016.23.010

摘要

目的：利用重叠延伸聚合酶链反应（SOE‐PCR）快速构建乙型肝炎病毒（HBV ）阿德福韦酯耐药株（RT A181T ）感染性克隆，观察重组质粒在Huh7细胞中的表达，建立 HBV阿德福韦酯耐药株（RT A181T ）的体外研究细胞模型。方法设计保守引物，从慢性乙型肝炎阿德福韦酯耐药患者血清中扩增全长 HBV基因组，利用SOE‐PCR技术构建1．3倍基因组长度的感染性克隆质粒pHBV1．3，转染肝癌细胞系Huh7，采Western Blot、Real‐time PCR检测感染性克隆复制以及表达情况，同时用抗病毒药物拉米夫定以及阿德福韦酯验证对感染性克隆复制及表达的抑制情况。结果成功构建了 HBV阿德福韦酯耐药株感染性克隆质粒pHBV1．3（RT A181T ），该质粒在Huh7细胞系中能有效复制、转录和表达。拉米夫定能有效抑制该感染性克隆的复制和表达，阿德福韦酯不能抑制该感染性克隆的复制和表达。结论构建的 HBV 阿德福韦酯耐药株感染性克隆质粒pHBV1．3（RT A181T ）在体外能高效复制及表达蛋白，其转染细胞可用于HBV复制机制及抗病毒研究。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆仁飞	江苏省南通市第三人民医院检验科	12	39	3.0	6.0
2	赵建华	江苏省南通市第三人民医院检验科	28	41	3.0	6.0