shRNA慢病毒载体稳定抑制LRP16表达的HepG2细胞的构建及鉴定

• 作者: 哈斯 李婷 母义明 汪保安 王安平
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: LRP16 短发卡RNA 慢病毒载体 HepG2细胞
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1406-1410,1572
• 分类号: Q78|R-33|R587.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2016.08.002

摘要

目的:构建LRP16基因抑制表达的HepG2稳定细胞系,鉴定其LRP16基因抑制表达的效果.方法:构建LPP-HSH008357-LVRH1GP-200短发卡RNA (shRNA)慢病毒表达载体,用该抑制表达慢病毒感染HepG2细胞系,通过荧光筛选及药筛,获得LRP16基因稳定抑制表达细胞系;最终运用Q-PCR和Western blot鉴定该稳定细胞系中LRP16的表达.结果:构建了LRP16基因抑制表达及抑制表达对照的HepG2稳定细胞系,并通过Q-PCR和Western blot进行了鉴定.Q-PCR结果显示相对于对照稳转株(LPP-CSHCTR001-LVRH1GP-100),抑制表达稳转株(LPP-HSH008357-7-LVRH 1GP-200)LRP 16基因的抑制效率是4组抑制表达细胞中效果最理想的一组,其抑制效率高达98％;Western blot结果也显示该抑制表达稳转株(LPP-HSH008357-7-LVRH 1GP-200)的LRP16蛋白表达量明显低于野生型HepG2细胞及对照稳转株(LPP-CSHCTR001-LVRH 1GP-100),其结果与Q-PCR一致.结论:构建并鉴定了人LRP16基因抑制表达HepG2稳定细胞系及其相应的对照稳转株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李婷	中国人民解放军总医院内分泌科	36	186	7.0	13.0
2	母义明	中国人民解放军总医院内分泌科	62	437	7.0	20.0
3	汪保安	中国人民解放军总医院内分泌科	6	46	4.0	6.0
4	王安平	中国人民解放军总医院内分泌科	7	15	2.0	3.0
5	哈斯	中国人民解放军总医院内分泌科	5	3	1.0	1.0