人羊膜上皮细胞对脂多糖刺激下的RAW264.7细胞向M1极化的预防作用及其初步作用机制

• 作者: 何妲 侯伟榕 彭琳 王建 陆文玲 黄生建
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 医学
• 关键词: 羊膜上皮细胞 巨噬细胞极化 M1巨噬细胞 NF-κB
• 年，卷（期）: 2016,（30）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 5819-5823,5832
• 分类号: R-33|R392.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2016.30.005

摘要

目的:本实验探讨人羊膜上皮细胞(human amniotic epithelial cells,hAECs)预防RAW264.7细胞在脂多糖(LPS)刺激后向M1极化的作用以及可能机制.方法:采用流式细胞仪检测细胞凋亡,划痕实验检测细胞迁移,ELISA检测细胞释放NO浓度,Real-time PCR检测白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、一氧化氮合成酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、精氨酸酶1(arginase-1,Agr-1)及甘露糖受体(mannose receptor,MR又称CD206)等基因表达情况,Western blotting检测RAW264.7胞质蛋白p-IκBα以及胞核蛋白NF-κB的表达.结果:RAW264.7培养基组与hAECs条件培养基干预组的凋亡率分别为5.68％±2.3％、6.68％±2.1％(p＞0.05).LPS刺激组与hAECs条件培养基干预组两组的迁移率分别为42.03±0.07％、14.71±0.04％ (p＜0.05);LPS刺激组与hAECs干预组两组NO释放量分别为27.73± 10 μM、13.33±6.43 μM(p＜0.05);Real Time-PCR结果显示,hAECs干预组M1型巨噬细胞相关基因如IL-1β、TNF-α、iNOS以及rNF-β的表达显著下调,M2型巨噬细胞相关基因如Arg-1、CD206、CD36等表达上调(p＜0.01).Western blotting结果显示,hAECs干预组RAW264.7中胞质蛋白p-IκBa以及胞核蛋白NF-κB的蛋白含量降低.结论:hAECs与RAW264.7预培养能有效预防LPS刺激下RAW264.7向M1极化,其机制可能是通过抑制IκBα蛋白磷酸化来降低核内NF-κB的含量,从而抑制了M1型相关基因的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何妲	中南大学基础医学院生殖与干细胞研究所	2	3	1.0	1.0
3	陆文玲	中南大学基础医学院生殖与干细胞研究所	2	3	1.0	1.0
6	彭琳		2	8	1.0	2.0
7	黄生建		2	8	1.0	2.0
8	侯伟榕	中南大学基础医学院生殖与干细胞研究所	1	1	1.0	1.0